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液相色譜儀色譜柱在色譜分析系統中主要起著(zhù)分離檢測物質(zhì)的作用,如同色譜系統的心臟,同時(shí)也是易損耗品。什么情況下會(huì )導致液相色譜柱柱效降低甚至“失效”
1、篩板堵塞
色譜柱入口篩板堵塞是常見(jiàn)的問(wèn)題之一,會(huì )導致柱壓升高、色譜峰拖尾、塔板數降低等問(wèn)題。通常分析樣品中微粒雜質(zhì)右可能堵塞色譜柱入口,因此分析時(shí),需要先過(guò)濾或者離心,乳濁或渾濁樣品應以0.25µm濾膜處理,也可用針頭過(guò)濾器過(guò)濾。進(jìn)樣器與泵密封墊的磨損也會(huì )帶入微粒,在進(jìn)樣閥與色譜柱之間使用0.25µm或0.45µm的在線(xiàn)過(guò)濾器,通??梢员苊膺@類(lèi)問(wèn)題
2、強保留樣品組分
強吸附性的樣品組分吸附在柱頭填料上,能?chē)乐氐赜绊懮V柱壽命。像生物組織或體液的提取物、天然產(chǎn)物等復雜樣品,極易造成柱頭的污染。相對較純的樣品,一般不會(huì )出現這一問(wèn)題。色譜柱應用中,色譜峰嚴重拖尾或分裂往往是強保留污染物在柱頭吸附的體現。
3、色譜柱裝填不良
裝填不良的色譜柱,在短時(shí)間應用后,填充床的壓縮通常使柱頭處產(chǎn)生塌陷,導致柱效突然降低。色譜柱的初始評價(jià)指標,如塔板數、不對稱(chēng)因子等往往不能很好地表征色譜柱床層的穩定性,這種情緒只能在實(shí)際應用中發(fā)現。
4、壓力因素
液相色譜儀色譜柱使用過(guò)程中的驟然壓力波動(dòng)、機械撞擊或溫度驟然變化都會(huì )對色譜柱床層產(chǎn)生影響,導致峰形變差和柱效降低。進(jìn)樣過(guò)程中,進(jìn)樣閥轉動(dòng)太慢可引起壓力波動(dòng),使色譜柱床產(chǎn)生裂隙,在柱切換時(shí)也存在同樣的問(wèn)題。使用填充良好的色譜柱,在較低柱壓下操作,可大大減少由壓力波動(dòng)造成的色譜柱損壞。
有些色譜柱廠(chǎng)家建議在使用液相色譜柱時(shí)加入保護柱,保護柱是收集、阻斷來(lái)自進(jìn)樣器的機械和化學(xué)雜質(zhì),以保護和延長(cháng)分析柱的使用壽命。